Žvilgantis genų terapijos pažadas

Iki septintojo dešimtmečio pabaigos molekuliniai biologai sukūrė visapusišką paaiškinimą, kaip veikia genai – jų medžiaga, struktūra, replikacija, raiška, reguliavimas ar kontrolė. Arba bent jau jie tai padarė prokariotams, paprasčiausiems vienaląsčiams organizmams (įskaitant bakterijas), ir virusams, vadinamiems bakteriofagais, kurie juos grobia. Šios srities lyderiai dabar ieškojo kur kas sunkesnės problemos: viską daryti iš naujo aukštesniems organizmams.

Tai, ko pareikalavo ši naujos kartos molekulinė biologija ir kas buvo sukurta vos per kelerius metus, buvo metodų rinkinys, skirtas tirti ir tiksliai manipuliuoti eukariotų, įskaitant gyvūnus ir augalus, genetiką. Naudojant atvirkštinę transkriptazę, kurią 1970 m. nepriklausomai atrado Howardas Teminas ir Davidas Baltimore'as, RNR užkoduoti genai gali būti nuskaityti atgal į DNR. Kai Danielis Nathansas ir Hamiltonas Smithas dirbo su restrikcijos fermentais, DNR segmentai gali būti iškirpti pasirinktose vietose. Greitai iš Stenfordo universiteto laboratorijų atsirado būdų, kaip susieti genetinę medžiagą iš skirtingų šaltinių. Su bet kuo galėsime derinti bet ką, tuomet man sakė vienas vyresnis mokslininkas. Antieną galime derinti su apelsinu. Pradinis tikslas buvo išsiaiškinti pagrindinius ląstelių biologijos klausimus, tiksliai išsiaiškinti, ką daro atskiri genai ir kaip jie tai daro. Tačiau iš karto nušvito šviesi viltis: šią įrankių dėžę galima neštis iš laboratorijos į kliniką, kad būtų galima išgydyti paveldimas ligas, kurias sukelia genetiniai defektai. Jau anksčiau kai kurie mokslininkai svajojo apie genų terapiją.

Ši istorija buvo mūsų 2006 m. lapkričio mėnesio numerio dalis

• Žr. likusią numerio dalį
• Prenumeruoti

Iki 1970 m. žmonėms buvo nustatyta apie 1500 genetiškai nulemtų ligų. Kai kurie pasirodo kūdikiams; kiti iškyla brendimo metu; kai kurios atsiranda tik pasibaigus aukos reprodukciniam gyvenimui. Kai kuriuos gali suvaldyti mitybos apribojimai, kai kuriuos – vaistai. Tačiau daugelio negalima išgydyti ar net numalšinti įprastine medicina. Nors beveik visi yra reti, o kai kurie – itin reti, bendrai jie buvo pripažinti varginančia ir brangia medicinine problema. Daugelis jų pasižymi dideliu psichikos sutrikimu. Pavyzdžiui, Lesch-Nyhan ligos aukos kenčia nuo sunkaus protinio atsilikimo. Jiems turi būti įtvaros rankos, nes kitaip jie graužia rankas ir rankas. Jie miršta vaikystėje arba ankstyvame pilnametystėje. Nors mokslininkai mažiau nei šimtą šių žmonių ligų nustatė dėl specifinių genetinių trūkumų, jie pradėjo ieškoti būdų, kaip jas išgydyti saugiai įterpdami koreguojančius genus į jomis sergančius žmones.

Jie vis dar bandė beveik po dviejų dešimtmečių, kai 1999 m. rugsėjo 29 d. Washington Post buvo paskelbta antrašte „Teen Dies Undergoing Experimental Gen Therapy“. Jesse Gelsinger buvo 18 metų, neseniai baigęs vidurinę mokyklą iš Arizonos ir sirgęs potencialiai mirtina genetine liga. Jis buvo vienas iš 18 pacientų, dalyvavusių tyrime Pensilvanijos universitete. Virusai, turintys naują geną, buvo suleisti į vieną iš arterijų, tiekiančių kraują į jo kepenis. Genų terapijoje inžinerijos būdu sukurtas virusas dažnai naudojamas kaip vektorius, tiekiantis norimą geną į paciento ląsteles; tačiau šiuo atveju virusas, matyt, sukėlė daugybę mirtinų įvykių.

The Niujorko laikas paėmė istoriją kitą dieną po to, kai ji pasirodė Įrašas . Nacionaliniai sveikatos institutai ir JAV maisto ir vaistų administracija pradėjo tyrimus, kurie vyko pagirtinu greičiu; paaiškėjo daugiau detalių. Vėliau įsitraukė JAV generalinis prokuroras. Bet su tais pirmaisiais laikraščių pranešimais , genų terapija atrodė mirusi.

Teismo procesas, kuriame dalyvavo Gelsingeris, buvo suteptas kaltinimų perdėtu pasitikėjimu, skubėjimu, aplaidžiu administravimu ir interesų konfliktu. Tačiau visa tai nukreipė dėmesį nuo opių ir esminių problemų, susijusių su pačia genų terapija – mokslo ir technologijų, klinikinio technologijos panaudojimo problemų, problemų, kurios jokiu būdu nebuvo naujos, tačiau Gelsingerio mirtis tapo akivaizdžiai akivaizdžia.

Trečdalį amžiaus stebėjau genų terapijos raidą ir stebėjau, kaip jai buvo švaistomi šimtai milijonų dolerių, kai naujos viltys cikliškai virto pelenais, o dramatiškos pretenzijos į liūdną farsą. Iki 2000 m. NIH buvo užregistruota daugiau nei 300 genų terapijos tyrimų, kuriuose dalyvavo daugiau nei 4000 pacientų, teigiama tais metais Atsakingos genetikos tarybos žurnale išspausdintame straipsnyje. GeneWatch . Gelsingerio afera buvo labiausiai viešinama nesėkmė. Buvo daug kitų.

Buvo dvi pagrindinės pesimizmo dėl genų terapijos priežastys. Kaip buvo aišku nuo pat pradžių, nors bendras genetinių defektų sukeltų ligų ir silpnumo krūvis visuomenėje yra didelis, dauguma atskirų ligų, kurias sukelia vieno geno defektai – tokios, kurias greičiausiai išgydys genų terapija – yra retos. (Pjautuvinė anemija ir kai kurie kiti hemoglobino sutrikimai yra tarp nedaugelio išimčių.) Visi šioje srityje tai pripažino. Atrodė, kad niekas nesusidūrė su pasekmėmis. Kadangi šios ligos turi skirtingus genetinius mechanizmus ir veikia skirtingus audinių tipus, kiekviena iš jų kelia naujų tyrimų problemų, kurias reikia išspręsti beveik nuo nulio. Milijonams sudeginus tapo aišku, kad net ir sėkmės atveju išlaidos vienam išgydytam pacientui ir toliau bus milžiniškos. O sėkmė visada blykčioja ir svyruoja tiesiog nepasiekiamai, ignis fatuus: nuo pat pradžių, žingsnis po žingsnio, visi neįvertino tikrų mokslo keliamų sunkumų.

Genų terapijos istoriją galima papasakoti kaip nuolat nusivylusią virusų, kurie puikiai veiktų kaip genų pristatymo apvalkalai, paieška, kartu su vis labiau gluminančiu suvokimu, kad norint sėkmingai gaminti norimus baltymus reikia kur kas daugiau nei kelių paprastų genų. Genų terapijos bendruomenei metai buvo nesėkmių kalendorius. Mes visiškai neįvertinome fakto, kad virusai gali sukelti tiek daug sunkumų, 2006 m. rugpjūčio mėn. man pasakė Inder Verma – molekulinis biologas iš Solko instituto La Jolla, Kalifornijoje. Mes neįvertinome fakto, kad virusams prireikė milijardų metų. išmokti gyventi mumyse – ir tikėjomės tai padaryti per penkerių metų dotacijų ciklą! Jis tęsė: „Žinai, kūnas sukurtas kovoti su virusinėmis infekcijomis. Šimtas procentų. Mūsų laimei! Ir čia mes grąžiname žmonėms milijardus virusų ir tikimės, kad jei turėsime gerą virusą, kūnas pasakys: „Viskas gerai, nes mes atnešame gerų dalykų“.

Pirmasis genų terapijos bandymas žmonėms prasidėjo nuo atsitiktinio stebėjimo. 1959 m. gydytojas Stanfieldas Rogersas iš Tenesio universiteto dirbo su Shope papilomos virusu, sukeliančiu karpas ant triušių odos. Jis pranešė į Gamta kad šių karpų odoje buvo neįprastai daug arginazės – fermento, skaidančio aminorūgštį argininą. Tada jis išsiaiškino, kad kai kuriems mokslininkams, dirbusiems su Shope virusu, net 20 metų praeityje sumažėjo arginino kiekis kraujyje.

Galimybė, kad virusas įnešė mokslininkams savo arginazės geną, buvo smalsumas – iki 1969 m. Lancetas paskelbė Kelno (Vokietija) pediatro Heinzo-Georgo Terheggeno ir kolegų darbą. Į Terheggeną buvo atvežtos dvi mažos mergaitės, labai protiškai atsilikusios ir kenčiančios nuo tam tikros formos cerebrinio paralyžiaus, pranešė britų žurnalas. Tyrimai parodė, kad juose buvo didelis arginino kiekis, o fermento arginazės buvo aptikta labai mažai. Tai buvo nauja genetinė liga.

Rogersas nuvyko į Terheggeną, prašydamas, kad jam ir jo kolegoms būtų leista suleisti merginoms Shope viruso, tikėdamasis suteikti joms funkcionuojantį arginazės geną. Dėl esminės atsargumo priemonės jie bandė pasėti virusą į vienos iš mergaičių ląstelių kultūrą. Jie pranešė Eksperimentinės medicinos žurnalas kad jie nustatė arginazės aktyvumą, matyt, dėl viruso įvesto geno. Tačiau tyrimo metu nebuvo jokio atsako, nesumažėjo arginino kiekis, nebuvo arginazės aktyvumo įrodymų. Po pertraukos vienam vaikui davė didesnę dozę. Vis dar jokio atsakymo. Bendras sutarimas buvo toks, kad Rogersas padarė per anksti bandymą, turėdamas nepakankamą mokslinį supratimą. Toks sprendimas nebuvo neteisingas.

1972 m. pavasarį Theodore'as Friedmannas ir Richardas Roblinas paskelbė pirmąjį išplėstinį tyrimą apie galimybę gydyti genetines ligas per genų perdavimą. Žmogaus genetinių ligų genų terapija? pasirodė Mokslas . Liga pagal ligą ir gydymas terapijos būdu, tyrėjai perspėjo apie milžiniškas technines problemas; daug, ką jie išdėstė, buvo numanoma. Jie buvo pirmieji, kurie išanalizavo galimą riziką, kurią pacientams kelia genų terapija, ir jos keliamus rimtus etinius rūpesčius.

Nepaisant to, dokumentas buvo propagavimo darbas. Pensilvanijos universitete įgijęs medicinos laipsnį, Friedmannas septintajame dešimtmetyje trejus metus praleido NIH, kur Jay Seegmiller laboratorijoje pradėjo dirbti su Lesch-Nyhan liga. Seegmiller atrado, kad ligą sukelia fermento hipoksantino fosforiboziltransferazės arba HPRT nebuvimas dėl jo geno defekto. Friedmannas tikėjosi rasti būdą, kaip į kultūros Lesch-Nyhan ląsteles įterpti tinkamą geną, galbūt naudojant virusą. Jo vaizduotę patraukė genų perdavimo perspektyva. Iš tiesų, būdamas pediatrijos docentu Kalifornijos universitete, San Diege, aštuntojo dešimtmečio pradžioje jis įvedė terminą genų terapija.

1983 m. sausio mėn. Friedmannas ir kolegos paskelbė, kad išskyrė įprastą HPRT geną. Inder Verma, su kuriuo Friedmannas bendradarbiavo devintojo dešimtmečio pradžioje, turėjo potencialų viruso pernešėją: šiuo atveju retroviruso rūšį, skirtą pelių leukemijai. 1983 m. rugpjūtį abu mokslininkai pranešė, kad sukūrė vektorių ir sėkmingai panaudojo jį, kad į graužikų ląsteles in vitro įneštų veikiantį žmogaus HPRT geną.

Po to pirminio sėkmės žvilgsnio, Verma sako, labai greitai paklausėme: „Ar galime tai padaryti in vivo?“ Jie pradėjo eksperimentus su gyvų pelių hemofilija. Genų defektai, sukeliantys hemofiliją, buvo žinomi: vieno baltymo trūkumas gali užkirsti kelią kraujo krešėjimui. Dirbdami in vitro, pridėdami tinkamą geną į ląsteles kultūroje, galėtume gaminti baltymą amžinai, sako Verma. Ir čia buvo pirmasis netikėtumas. Kai ląstelės buvo grąžintos į peles, jos akimirksniu nustojo gaminti baltymą. Ir tai yra pirmasis mūsų pripažintas apribojimas: retrovirusai gali įvesti genus tik tada, kai ląstelės dalijasi. Verma priduria: „Galėtume išimti [ląsteles], išauginti jas in vitro, perpilti virusu, įdėti atgal, bet kai grąžiname atgal, jos išsijungia. Kodėl? Mes vis dar neturime supratimo, sako jis.

Tada, 1990 m., NIH tyrimų gydytojas Williamas Frenchas Andersonas karštai viešai paskelbė, kad pradeda genų terapijos tyrimą, kurio metu gydomos dvi jaunos mergaitės nuo sunkaus kombinuoto imunodeficito arba SCID. Šia liga sergantiems žmonėms visiškai trūksta normalios imuninės sistemos. Jų kaulų čiulpų pirmtakų ląstelės, kurios turėtų gaminti baltuosius kraujo kūnelius, yra pažeistos, todėl pacientai suserga visomis infekcinėmis ligomis, su kuriomis baltieji kraujo kūneliai turėtų kovoti. Lengvos infekcijos tampa sunkios; rimti juos nužudo. Jie miršta ankstyvoje vaikystėje. Anderson teigė, kad abi mergaitės kenčia nuo SCID formos, kurią sukėlė fermento adenozino deaminazės (ADA) trūkumas. Jis jiems suleido koreguojančius genus, perneštus pelių leukemijos viruse.

Andersonas buvo nepaprastai efektyvus genų terapijos ir savęs publicistas. Jis paskelbė, kad dvi mažos mergaitės buvo išgydytos. 1994 m. rugsėjį jis atvedė vieną iš jų liudyti į JAV Atstovų rūmų Mokslo komitetą. Tada jai buvo aštuoneri metai, ji buvo gyvybinga ir, regis, sveika. Pranešama, kad komiteto pirmininkas ją pavadino gyvu įrodymu, kad įvyko stebuklas. Andersonas pasirūpino, kad visuomenė būtų žinomas kaip genų terapijos tėvas, netgi pateikdamas pavadinimą savo svetainėje.

Tačiau jo moksliniai kolegos ir konkurentai tapo įnirtingi, net niekinantys. Tiesą sakant, teismo procesas su dviem merginomis žlugo. Visą laiką mergaitės taip pat buvo gydomos sintetinio ADA injekcijomis. O Verma ir Friedmannas jau įrodė, kad pelių leukemijos virusas nesugeba įvesti genų in vivo. Vermos teigimu, ADA baltymas niekada nebuvo gaminamas. Dar prieš merginai pasirodžius Atstovų Rūmų komitete, apie nesėkmę žinojo visa medikų bendruomenė.

Kadangi retrovirusai sukėlė sunkumų in vivo, dėmesys buvo nukreiptas į adenovirusus, įskaitant virusus, sukeliančius tam tikras sunkias viršutinių kvėpavimo takų infekcijas žmonėms. Jie dirbo. Jie buvo nuostabūs, sako Verma. Visų pirma, jūs galite sukurti milijardus viruso dalelių. Antra, kad ir kur būtų įvestos dalelės, importuoti genai būtų išreikšti. Daugelis mokslininkų perėjo prie adenovirusų. Tačiau jie pasirodė labai imunogeniški: juos sunku saugiai naudoti, nes gali sukelti stiprias imunines reakcijas. Tada atsirado adeno-associated virusai, AAV. Kadangi AAV turi tik du baltymus, jie mažiau provokuoja imuninę sistemą nei adenovirusai.

1994 m. rudenį NIH direktorius Haroldas Varmusas vis skeptiškiau žiūrėjo į genų terapijos tyrimų kokybę. Agentūros Rekombinantinės DNR patariamasis komitetas (RAC) peržiūrėjo visus NIH finansuojamų genų terapijos bandymų su žmonėmis protokolus. Pirmasis komiteto rūpestis buvo saugumas. Tačiau kai jo rekomendacijos buvo perduotos galutinai patvirtinti, o tai paprastai buvo įprasta, Varmus suprato, kad komitetas sistemingai nevertino tyrimų mokslinių privalumų.

Paaiškėjo, kad Andersonas buvo tik pats baisiausias iš daugelio ekstravagantiškų ir nepagrįstų teiginių, susijusių su genų terapija. Nors NIH kasmet skirdavo 200 milijonų dolerių genų terapijos tyrimams, o didelės farmacijos įmonės ir būriai biotechnologijų startuolių vėl išleidžia tiek pat, jokiame recenzuojamame žurnale nebuvo pranešta apie sėkmę su žmonėmis. 1995 m. gegužės mėn. Varmusas sušaukė grupę, kuriai vadovavo Harvardo medicinos mokyklos profesorius Stuartas Orkinas ir Vašingtono universiteto Sietle genetikas Arno Motulsky, kad peržiūrėtų genų terapijos tyrimų būklę ir įvertintų, kaip turėtų būti paskirstytos lėšos. tarp genų terapijos tyrimų sričių.

Orkinas ir Motulskis gruodį pranešė plačiai ir įžūliai. Genų terapijos pažadas atrodė puikus, tačiau jos nesėkmės išliko, nepaisant to, kad RAC patvirtino daugiau nei šimtą protokolų. Dauguma klinikinių tyrimų buvo per maži ir tiriamojo pobūdžio, kad būtų galima įvertinti medicininius gydymo privalumus; jiems trūko tinkamos kontrolės ir griežtai nustatytų tikslų. Grupės nariai padarė išvadą, kad genų terapija buvo plačiai ir žalingai perparduota.

Balionas buvo pradurtas. Kiekvienoje įprastoje sesijoje RAC svarstė apie 15 protokolų; tačiau kitas susitikimas, numatytas 1996 m. kovo mėn., buvo atšauktas. Pasiūlymų, kuriuos reikėtų peržiūrėti viešai, nebuvo pateikta.

Po trejų metų mirė Jesse Gelsinger.

Gelsingeris ir kiti 17 pacientų, dalyvavusių tyrime Pensilvanijos universitete, buvo gydomi dėl fermento ornitino transkarbamilazės trūkumo, kurį kepenys naudoja amoniakui, šalutiniam baltymų virškinimo produktui, suskaidyti į nekenksmingas atliekas. Sunkiausia forma trūkumas žudo kūdikius pirmaisiais gyvenimo metais. Gelsingeris buvo laikomas gyvas laikantis griežtos dietos ir tablečių režimo. Sužinojęs apie genų terapijos tyrimą, jis pasisiūlė.

Tyrimas buvo atliktas universiteto Žmogaus genų terapijos institute, kuriam vadovavo Jamesas Wilsonas. Tai buvo vienas geriausių tokių centrų šalyje. Korekcinis genas buvo įkeltas į adenovirusą. 18 pacientų buvo suskirstyti į grupes, kurios gavo vis didesnes dozes. Gelsingeris gavo didžiausią – 38 trilijonų viruso dalelių kultūrą. Jis gavo dozę 1999 m. rugsėjo 13 d. Rugsėjo 15 d. jo gyvybiniai rodikliai smarkiai krito. Tėvui sutikus, jam buvo atimta gyvybę palaikanti priemonė, ir jis mirė rugsėjo 17 d.

Jesse'o Gelsingerio mirtis buvo pirmoji tiesiogiai susijusi su genų terapija. Maždaug šimtas eksperimentuotojų, naudojančių adenoviruso vektorius, buvo perspėti. Spaudoje ir mokslo žurnaluose šis atvejis buvo paskelbtas kaip katastrofa šioje srityje.

NIH ištyrė ir sušaukė specialų viešą susirinkimą gruodžio 8, 9 ir 10 d. Problema tapo aiškesnė. Tyrimų protokole, kurį prieš ketverius metus patvirtino RAC ir FDA, buvo reikalaujama, kad adenoviruso vektorius būtų švirkščiamas į veną. Vėliau FDA leido tiesiogiai švirkšti vektorių į kepenų arteriją, o tai buvo iš tikrųjų naudojamas metodas. Nepaisant to, Gelsingerio skrodimas parodė, kad vektorius buvo plačiai paplitęs jo blužnyje, limfmazgiuose ir kaulų čiulpuose.

Tuo tarpu FDA atliko savo tyrimą. Tyrėjai buvo griežtai pasmerkti. Bandymo dalyvių atranka geriausiu atveju buvo aplaidžia: Wilsonas ir jo kolegos negalėjo pateikti įrodymų, kad kuris nors iš savanorių atitiko bandymų kriterijus. Informuoto sutikimo procedūros buvo labai netinkamos. Federalinės taisyklės reikalauja, kad nauda ir rizika būtų išsamiai ir aiškiai paaiškinta; Paulas Gelsingeris, Jesse tėvas, sakė New York Times, kad šeima buvo priversta manyti, kad gydymas gali padėti Jesse, nors bandymas buvo skirtas tik kūdikiams kuriamo gydymo saugumui patikrinti. Be to, sutikimo formoje nebuvo paminėta, kad beždžionės mirė po panašaus, nors ir stipresnio gydymo. 1992 m. Wilsonas įkūrė privačią tyrimų kompaniją „Genovo“, kurioje turėjo akcijų. Bendrovė neskyrė pinigų šiam konkrečiam tyrimui, tačiau ji įnešė sveiką dalį Žmogaus genų terapijos instituto bendro biudžeto.

2000 m. sausio 21 d. agentūra nurodė laikinai sustabdyti visus genų terapijos tyrimus Wilsono institute. 2005 m. Wilsonas susitarė su JAV teisingumo departamentu: penkerius metus jis neturėjo vadovauti jokiems klinikiniams tyrimams, kuriuos reglamentuoja FDA.

Atrodė, kad viltis išgydyti genų terapija, mirė kartu su Jesse Gelsinger. Tačiau 2000 m. vasario mėn. Friedmannas pasakė įžanginę kalbą per pirmadienio rytą kasmetiniame Amerikos mokslo pažangos asociacijos susitikime Vašingtone. Jis apžvelgė esminius genų terapijos sunkumus, kalbėjo apie daugybę šimtų patvirtintų, bet iki šiol neproduktyvių protokolų. Jis priminė savo klausytojams apie nekantrų Varmuso kaltinimą 1995 m., kad laukas buvo nepaprastai perparduotas. Tada – ryškiai pasikeitus tonui – jis pasakė: „Esame ant terapinio veiksmingumo slenksčio“.

Dvi darbo kryptys jam atrodė teisingos. Pora Amerikos laboratorijų pradėjo klinikinius hemofilijos genų terapijos tyrimus. Norint tinkamai krešėti kraują, reikia reakcijų kaskados, kurią kontroliuoja daugybė baltymų. Hemofilija A, dažniausia ligos forma, atsiranda dėl vieno iš šių baltymų geno defekto – 8 faktoriaus; hemofilija B sukelia kito, 9 faktoriaus, geno defektas. Tyrimas, Friedmannas manė, kad teisingumo jausmas atsirado dėl Katherine High, Filadelfijos vaikų ligoninės hematologės darbo su hemofilija B. Stenforde genų terapeutas ir virusologas Markas Kay taip pat dirbo su hemofilija B. Kay ir High sujungė savo pastangas. Jų metodai veikė su ligos gyvūnų modeliais. Jie buvo pasirengę pradėti bandymus su žmonėmis.

Tačiau įtikinamiausi rezultatai, pasak Friedmanno, buvo gauti iš vaikų gydytojų grupės Paryžiuje. Jų vadovas buvo vyras, vardu Alainas Fischeris, gydytojas, dirbantis su mažais berniukais, sergančiais SCID forma. Kaip ir mergaitės, kurias NIH Andersonas gydė nuo ADA trūkumo, šie vaikai negamina T limfocitų – baltųjų kraujo kūnelių, kovojančių su infekcija. Tačiau jų sutrikimą sukėlė kitas genas. Vaikai sirgo; jie nebuvo klestintys. Tada Fischeris ir jo kolegos išbandė genų terapiją. Šie vaikai dabar, atrodo, yra visiškai imunologiškai atstatyti, sakė Friedmannas. Atrodo, kad visos jų imuninės savybės yra optimizuotos. Jis tęsė: Ir tai, kas jame taip įspūdinga, visų pirma yra tai, kad jis atsirado iš niekur. Jis atėjo iš kairiojo lauko. Imuninės sistemos sutrikimų ekspertai tikrai turėjo žinoti apie Alainą Fischerį ir jo grupę, sakė Friedmannas, tačiau genų terapijos bendruomenė nebuvo taip gerai susipažinusi su jo darbu. Be to, susitikimuose jis pateikiamas labai kukliai, labai kukliai, sakė Friedmannas. Jie tiesiai šviesiai sako, kad metoduose nėra nieko naujo – jie sukūrė tik atsitiktinai gero ligos modelio derinį [su] daugybe standartinės retrovirologijos, kuri buvo sukurta daugelį metų.

Fischeris ir tuzinas kolegų 2000 m. balandžio 28 d. žurnale „Science“ pranešė apie savo metodą ir sėkmę gydant pirmuosius du pacientus. Vėliau jie paskelbė 2002 m. balandžio 18 d.

Tuo tarpu Markas Kay ir Katherine High pranešė, kad kai jie suleido savo vektorių šunims, sergantiems hemofilija B, šunys turėjo gydomąjį atsaką. Avigen, biotechnologijų įmonė, kurios būstinė yra Alamedoje, Kalifornijoje, bendradarbiavo su High ir Kay, kad planuotų klinikinius gydymo saugumo žmonėms tyrimus.

2002 m. lapkritį prancūzų mokslininkai sustabdė savo bandymus. Pacientų skaičius siekė iki 10, bet dabar vienas iš tų pacientų, kurių imuninė sistema buvo visiškai normali, susirgo liga, panašia į leukemiją, nekontroliuojamą atkurtų baltųjų kraujo kūnelių dauginimąsi. .

Tada 2004 m. birželio 4 d. žurnale „Science“ buvo pranešta, kad „Avigen“ atsisakė hemofilijos gydymo bandymų. Dviem iš septynių pacientų buvo šiek tiek padidėjęs kepenų fermentų kiekis.

2005 m. rugsėjo 28 d. nuėjau pas Alainą Fischerį į Hôpital Necker, vaikų ligoninę Paryžiuje. Jis buvo tiesus ir aiškus. Aš nesu genų terapijos specialistas, iš karto pasakė. Mano tikroji sritis yra imunologija, o imunologijos srityje – genetinės imuninės sistemos ligos. Su šiomis ligomis jis dirbo 25 metus. Aš esu gydytojas. O čia yra klinikinis skyrius, kuriame globojami imunologinėmis ligomis sergantys vaikai. Taigi nuo to ir pradedu. Kokios ligos? Visų rūšių, sakė jis. Dėl T limfocitų, B limfocitų, įgimto imuniteto trūkumo yra... Jis įkvėpė kvapą. Mes dar tiksliai nežinome. Yra mažiausiai 140 skirtingų imunologinių ligų. Jis pridūrė: jie visi labai skirtingi.

Fischeris tęsė: „Mes netapsime genų terapijos specialistais, tai yra, bandysime pritaikyti genų terapiją įvairioms ligoms. Tai nėra mūsų tikslas. Esame šių imunologinių ligų specialistai, o genų terapija yra viena iš šių pacientų gydymo strategijų. Dešimtojo dešimtmečio pradžioje jį patraukė genų terapija, kai buvo nustatytas naujas genas, kuris mutavęs sukelia tam tikrą SCID formą. Jis buvo susidūręs su pacientais, turinčiais mutaciją. Labai greitai, per vienerius ar dvejus metus, supratome ligos patofiziologiją, – prisiminė Fischeris. Ir tuo metu supratome, kad ši liga gali būti geriausia kandidatė išbandyti genų terapiją. Tam tikro veiksmingo gydymo poreikis tikrai buvo didžiulis. Pasak jo, kaip ir visos SCID formos, be gydymo šis miršta per pirmuosius gyvenimo metus. Vienintelis gydymas buvo kaulų čiulpų transplantacija; tačiau jų sėkmės rodiklis krenta, nebent pavyksta rasti identiškų imuninės sistemos atitikmenų, ir tai įmanoma tik apie 20 procentų laiko.

Fischeris sakė, kad ligos paveiktų ląstelių tipai taip pat tapo geru kandidatu gydyti genų terapija. Pirma, kai genas, kuriame įvyksta mutacija, veikia tinkamai, jis koduoja baltymą, kuris yra gyvybiškai svarbus, kad T limfocitų pirmtakai išgyventų ir daugintųsi. Antra, skirtingai nei kitų tipų imuninės sistemos ląstelės, T limfocitai gali išgyventi dešimtmečius – kartais net visą gyvenimą.

Šie du faktai reiškė, kad net jei mokslininkai galėtų genetiškai pakeisti tik kelias pirmtakų ląsteles, šios ląstelės gali išsivystyti – arba, kaip teigia mokslininkai, diferencijuotis – į daugybę subrendusių T ląstelių, kurios pacientui turėtų ilgalaikės naudos. Taigi mes turėjome viltį, sakė Fischer, kad labai prasta technologija gali veikti tokiame kontekste su ta liga.

Tada atėjo sloga. Mes sukūrėme vektorius, retrovirusinius vektorius, geriausią to meto technologiją, bla bla bla, prisiminė Fischeris. Bet testai praėjo gerai. Iki 1998 m. Fischeris ir jo kolegos buvo pasirengę prašyti leidimo pradėti bandymus su žmonėmis.

Pirmasis tyrimas prasidėjo 1999 m. kovo 13 d. Ir nuo 1999 m. iki 2002 m. gydėme 10 pacientų, sakė Fischeris. Tyrėjai iš pacientų paėmė kaulų čiulpus, kuriuose buvo limfocitų pirmtakų ląstelės. Ląstelių kultūroje jie įvedė vektorių – neįgalų retrovirusą su koreguojančiu genu. Po kelių dienų jie vėl suleido ląsteles pacientams. Devyniais iš dešimties mums buvo malonu matyti, kad tai pavyko, sakė jis.

Kaip tikėjosi Fischeris ir jo komanda, apdorotų pirmtakų ląstelių, galinčių generuoti T ląsteles, skaičius buvo labai mažas. Tačiau jis sakė, kad pakako pagaminti normalų T ląstelių skaičių. Po kelių mėnesių šie vaikai galėtų palikti ligoninę ir pradėti normaliai gyventi su tėvais. Ir išskyrus tuos, kurie turėjo komplikacijų, apie kurias trumpai papasakosiu, jie ir šiandien gyvena įprastai.

Po pirmųjų trejų metų trims iš dešimties gydytų vaikų išsivystė sunki komplikacija – nekontroliuojamas T limfocitų dauginimasis. Aš tai pavadinčiau liga, panašia į leukemiją, sakė Fischeris. Vaikų leukemija paprastai gali būti išgydoma didelėmis chemoterapijos dozėmis, todėl Fischeris ir jo kolegos gydė tris pacientus. Vienas mirė. Kiti du vaikai šiandien laikosi gerai, kaip ir kiti septyni, sakė Fischeris.

Kiek visa tai kainavo? Daug! Fišeris staigiai nusijuokė. Daug; bet tokia liga sergančio vaiko gydymas be genų terapijos kainuoja irgi nemažai. Taip, sakė jis, vienam pacientui tyrimų kaina yra didžiulė. Tačiau pačios terapijos kaina nėra tokia didelė. Tarkime, kad jis komercializuotas. Manyčiau, kad pačios terapijos kaina, o vektoriaus – ląstelių gydymo ex vivo – kaina neturėtų kainuoti daugiau nei galbūt kažkur nuo 30 000 iki 50 000 USD, kažkas panašaus. Vienam pacientui. Maždaug tas pats, kas širdies persodinimas? tiksliai! jis pasakė. Kadangi tai tampa tam tikra citata, „rutinine terapija“, tai nėra daug aukštesnė už daugelį kitų terapijų.

Ir tos komplikacijos? Pažiūrėsime, kada turėsime pakankamai tolesnių veiksmų, kad įsitikintume, sakė jis ir pridūrė, kad jei tokios komplikacijos tikimybė sumažėtų 10 kartų, rizikos ir naudos santykį jis laikytų visiškai priimtinu. Fischeris sakė dar nežinantis, ar jo metodai gali būti apibendrinti ir kitų tipų genetiniams defektams; jis nekelia jokių didelių pretenzijų. Jo grupė pirmiausia pereina prie dviejų kitų imunodeficito ligų, susijusių su kitais genais. Taigi norime žingsnis po žingsnio pereiti nuo lengviausių prie sudėtingiausių.

Nuo pirmos galimybės akibrokšto iki šių dienų Theodore'as Friedmannas rašė ir kalbėjo kaip aršiausias genų terapijos gynėjas. Jis matė, kaip medicina patenka į naują erą, kuri siūlo naujus ir galutinius gydymo būdus, kurie anksčiau buvo tik svajonių ir mokslinės fantazijos dalykai. Jis taip pat buvo atsargumo, proto balsas. Jis turėjo perspėti savo kolegas, kad jie turi atvirai spręsti savo disciplinos sunkumus, ribotumą, nesėkmes. Tačiau jis ir toliau stebisi precedento neturinčiomis genų perdavimo galimybėmis. Jis sako, kad pirmą kartą ir galima pajusti jo tylų džiaugsmą, medicina gali daugiau nei gydyti požymius ir simptomus. Jis gali pasiekti pagrindines priežastis. Jis gali išgydyti. Bus sunku, sako jis. Tačiau medicina visada turėjo dirbti su netobulomis žiniomis ir technologijomis.

Horace'as Freelandas Judsonas yra penkių knygų autorius, įskaitant „Aštuntoji kūrimo diena“ – molekulinės biologijos istoriją, kuri buvo išleista 1979 m. ir vis dar spausdinama.

paslėpti